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세포 증식/ MTT 혹은 CCK8


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Cyagen은 MTT 비색법과 Cell Counting Kit에 기반한 세포 증식 서비스를 제공한다.

 

1. MTT법 (MTT 비색법)

MTT법은 세포 생존과 생장을 검사하는 일종의 방법이다. 검사 원리는 생세포 미토콘드리아 속의 호박산 탈수소 효소가 외생 MTT를 불수용성의 남자색(蓝紫色) 결정인 Formazan으로 환원하여 세포에 침적시키는 것이며 죽은 세포는 이러한 기능이 없다. 다이메틸설폭시화물(DMSO)은 세포 내 Formazan을 용해할 수 있고, 효소연관면역 검사기로 540 또는 720nm 파장에서 광흡수치를 측정해 생세포 수를 간접적으로 반영할 수 있다. 일정한 세포수 범위 내에서 MTT 결정으로 형성된 양은 세포의 수와 정비례한다. 이 방법은 이미 일부 생물 활성인자의 활성 검사, 대규모 항암약물 선별, 세포독성 시험, 종양 방사선 감도 측정 등에 광범위하게 사용되고 있다.

 

2. Cell Counting Kit (CCK-8)

CCK-8 KIT는 WST-8(화학명 2-(2-Methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-5(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium sodium salt)를 기반으로 세포 증식과 세포 독성의 빠른 고감도 검사에 광범위하게 사용되는 KIT이다. WST-8는 전자 커플링 KIT가 존재하는 상황에서 미토콘드리아 내 탈수소 효소에 의해 높은 수용성의 노란색 Formazan 산물로 환원될 수 있다. 색상의 짙고 옅음은 세포의 증식과 정비례하며, 세포의 독성에 반비례한다. 450nm 파장에서 microplate reader를 사용하여 OD값을 측정하여 생세포 수를 간접적으로 반영한다. CCK-8 는 현재 대량신속처리 연구 약물의 선별, 세포 증식 측정, 세포 독성 측정, 종양 민감성 시험 및 biology factor의 활성 검사 등에 널리 사용되고 있다.

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