Cyagen의 전문가가 프로젝트 요구 사항에 대한
견적,
정보 및 예상 소요시간을 제공해 드릴 것
입니다.
"Among several commercial services who have claimed to be specialized to generate mouse models with genetic modifications, I recognize that Cyagen is one of the best. We are looking forward to having more cooperation with them."
Korea Brain Research Institute (KBRI)영업일 기준 1-2일 내에 답변해 드리겠습니다.
Item Number: C001316
Strain Name: NOD-Prkdcscid Il2rgem1/Cyagen
Genotype: Homozygous
Background: NOD-Scid
NKG 마우스는 Cyagen이 NOD-Scid 배경 균주에서 독립적으로 개발한 Il2rg 유전자 녹아웃 중증 면역결핍 마우스 모델입니다. NKG 마우스 모델은 성숙한 T, B, 자연살상(NK) 면역세포가 부족해 보체 활성이 떨어지고 인간 세포에 대한 대식세포의 식작용이 약해집니다. 이 모델은 이식된 조혈모세포(HSC), 말초혈액 단핵세포(PBMC), cell-derived xenografts (CDXs), patient-derived xenografts (PDXs) 또는 adult stem cells 및 조직. NKG 마우스는 NOD SCID 마우스보다 수명이 더 깁니다. NKG 마우스는 흉선 림프종(thymic lymphoma)을 발전시키는 경향이 높습니다.
NKG 마우스 모델은 면역결핍이 높은 것으로 알려져 있으며 종양, 면역, 자가면역질환, 면역치료 백신, 이식편대숙주병(GVHD), 안전성 평가 등 연구에서 좋은 성과를 보이고 있습니다.예를 들어, 인간 IL2 transgenic NKG 마우스는 종양침윤림프구(Tumor 침윤 림프구, TILs)의 치료 효과를 평가하는 데 사용할 수 있으며, 인간 IL15 NKG 마우스는 CAR-NK 치료 효과를 평가하는 데 사용할 수 있습니다.
NKG 마우스와 같은 차세대 면역 결핍 마우스 모델은 암 면역 치료 연구에 도움이 되는 몇 가지 특징을 가지고 있습니다.
● 성숙한 T 세포, B 세포 및 NK 세포 부족
● 보체활동 감소
● 대식세포와 수지상세포의 기능장애
● 나이가 들면서 T와 B 세포의 누출 발생률이 매우 낮다
● 림프종 발병률 극히 낮음(NOD SCID 모델과 다름)
● 장·단기 실험에 사용 가능
● 당뇨병에 걸리지 않습니다
● NKG 마우스는 NOD SCID 마우스보다 수명이 더 긴 반면, NOD SCID 마우스는 흉선 림프종(thymic lymphoma)을 발달시키는 경향이 높습니다.
● NKG 마우스는 NOD SCID 마우스 와 비교하여 더 나은 CDX/PDX 이식률을 보였습니다.
● 인간 조혈모세포(HSCs), 말초혈액 단핵세포(PBMCs), 환자 유래 이종 이식(PDXs) 또는 성체 줄기세포와 조직을 효율적으로 이식합니다.
● 종양, 면역, 자가면역질환, 면역치료백신, GvHD/이식, 안전성평가 등의 연구에 사용할 수 있습니다.
1. Prkdc 유전자 돌연변이
그림 1. Prkdcscid 돌연변이는 Prkdc 유전자 84 엑손 TAT→TAA에 의해 생성된다.
시퀀싱 결과는 NKG 마우스가 Prkdcscid 돌연변이를 가지고 있음을 보여주었다.
2. Il2rg유전자 녹아웃
그림 2. PCR 을 통해 NKG 마우스의 II2rg 유전자를 검출한 결과 NKG 마우스의 II2rg 유전자를 성공적으로 녹아웃되는 것으로 나타났다.
야생형 밴드의 크기는 1430bp이고 녹아웃 단편 밴드의 크기는 388bp입니다.
3.NKG 마우스의 말초혈액에서 B, T, NK 세포의 검출
그림 3. NKG 마우스는 말초 혈액에 B, T 및 NK 세포가 심각하게 결핍된 중증 복합면역결핍증(SCID) 마우스 모델입니다.
BALB/c 및 NKG 마우스의 말초 혈액 샘플을 수집하고 flow cytometric immunophenotypic analysis 을 수행하고 T, B 및 NK 세포의 구성을 통계적으로 비교했습니다. 그 결과 NKG 마우스의 말초 혈액에 B 세포(CD3-CD19+), T 세포(CD3+CD19-), 보조 T 세포(CD3+CD4+CD8-), 세포독성 T 세포(CD3+CD4-CD8+) 및 NK 세포(CD335+CD3-)는 BALB/c 마우스와 비교하여 거의 완전히 존재하지 않는 것으로 나타났습니다.
4.NKG 마우스 림프 조직에서 B, T, NK 세포의 검출
그림 4. 중증 복합 면역 결핍(SCID) 마우스 모델 NKG 마우스의 림프 조직에는 B, T 및 NK 세포가 심각하게 부족합니다.
BALB/c 및 NKG 마우스의 림프 조직 샘플을 수집하고 flow cytometric immunophenotypic analysis 을 수행하고 T, B 및 NK 세포의 구성을 통계적으로 비교했습니다. 그 결과 NKG 마우스의 림프 조직에 B 세포(CD3-CD19+), T 세포(CD3+CD19-), 보조 T 세포(CD3+CD4+CD8-), 세포독성 T 세포(CD3+CD4-CD8+) 및 NK 세포(CD335+CD3-)는 BALB/c 마우스와 비교하여 거의 완전히 존재하지 않는 것으로 나타났습니다.
5. huPBMC-NKG
그림 1. huPBMC-C-NKG 마우스의 생존 곡선입니다.
huPBMC-C-NKG 마우스는 이식편대숙주병(GvHD)의 발병과 함께 점차 사망했다.
그림 2. 인간 pbmc를 NKG 마우스에 이식한 후 말초 혈액의 인간 CD45+ 세포 함량의 변화입니다.
PBMC 이식 후 NKG 마우스의 말초혈액 내 인간 백혈구 함량은 점차 증가하였고, 3주 후 CD45+의 평균 비율은 약 50%였다.
그림 3. 인간 pbmc를 NKG 마우스에 이식한 후 말초혈액 내 인간 CD3+ 세포 함량의 변화.
huPBMC-NKG 마우스의 재구성은 T 세포를 위주로 한다.
6. 인간 종양 세포 이종 이식 (CDX) 모델
그림 1. 인간 간암 세포 Huh7 피하 이종 이식종의 성장 곡선.
그림 2. 인간 위암 HGC-27 세포 피하 이종 이식종 성장곡선.
그림 3. Human colon adenocarcinoma SW620 피하 이종 이식종 성장 곡선.
NKG 마우스와 NOD/Scid 마우스 모두에 세포를 피하 접종하고 다양한 시점에서 종양 부피를 측정했습니다. 세포 파종량은 5× 106/cell 이며, 데이터는 Mean±SEM 으로 표시되었습니다. 결과는 인간 간암 세포 Huh7, 인간 위암 세포 HGC-27 및 human colon adenocarcinoma 세포 SW620이 C-NKG 마우스 종양 모델을 효과적으로 확립할 수 있음을 보여줍니다.
Cyagen은 프로젝트에 대한 신뢰할 수 있고 편리한 데이터 보고를 제공하는 다양한 약물 평가 모델과 표현형 분석 서비스를 제공할 수 있습니다.
지금 바로 견적을 요청하거나 service-apac@cyagen.com를 이메일로 보내거나 8620-31601779로 Cyagen의 서비스에 문의하고 프로젝트에 대한 견적을 얻을 수 있습니다.