녹아웃(KO) 마우스 | Cyagen Korea

바이러스 운반체 설계 및 개발


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Cyagen의 전문가가 프로젝트 요구 사항에 대한
견적, 정보 및 예상 소요시간을 제공해 드릴 것
입니다.

유전자 전송 도구의 선택은 유전자 치료 중 중요한 일환입니다. 약물이 최종적으로 인체에서 약효를 발휘하는 것은 대부분 안정적이고 효율적인 전송 시스템에 달려 있습니다. 현재 유전자 치료에 자주 쓰이는 운반체는 바이러스 운반체와 비바이러스 운반체를 포함하고 있는데, 바이러스 운반체는 숙주의 범위가 넓어 작용 시간이 길기 때문에 유전자 치료 연구에서 점점 더 광범위하게 응용되고 있으며, 코딩 유전자나 비코딩 유전자의 과잉 표현, 교란, 두드림, 내원성 활성화 등의 조작이 가능합니다. 상용 도구인 바이러스는 아데노 관련 바이러스(AAV), 아데노바이러스(ADV), 느린 바이러스(LV)와 같은 서로 다른 감염 특성을 가지고 있습니다. 이 가운데 AAV 는 조직특이성, 저면역원성, 높은 안전성 등의 장점을 갖추고 있어 현재 유전자 전도및 유전자 치료에 가장 널리 사용되는 전달체입니다.

Cyagen은 다년간의 바이러스 포장 플랫폼의 경험을 바탕으로 다양한 품질 기준의 AAV, LV, ADV 등의 바이러스를 제공할 수 있습니다. 성숙하고 안정적인 바이러스 포장 플랫폼으로, 고객의 여러 문헌을 인용하여 발표하며, 각종 세포계 모델의 구축과 생체 동물의 체내 연구에 널리 활용되고 있습니다. AAV 바이러스 패키지에 대해 삼질립자 공전염의 방법과 진보된 순화 공법으로 고순도, 고적도, 서로 다른 혈청형의 AAV 패키징 맞춤화 서비스를 제공할 수 있으며, 특히 동물 체내 실험에 적합하여 유전자 치료 연구자의 개성화된 선택을 만족합니다.
 
Cyagen은 다음의 AAV 포장 서비스에 국한되지 않습니다.
 

AAV운반체 종류

바이러스 량

바이러스 점적도

서비스 주기

정제 된 과발현 AAV 소량 제비

≥1*10^12 GC

≥1*10^12 GC/mL

빠르면 5-6주 가능

정제 된 과발현 AAV 중량 제비

≥5*10^12 GC

≥1*10^13 GC/mL

순화 방해AAV 소량 제비(3+1)

≥1*10^12 GC

≥1*10^12 GC/mL

순화 방해AAV 중량 제비(3+1)

≥5*10^12 GC

≥1*10^13 GC/mL

정제 녹아웃 AAV 소량 제비

≥1*10^12 GC

≥1*10^12 GC/mL

정제 녹아웃 AAV 중량 제비

≥5*10^12 GC

≥1*10^13 GC/mL

비고: 일반 항목에 대조 그룹 바이러스 증정
 
Cyagen 생물은 다음의 AAV 혈청형에 국한되지 않습니다.
 

혈청형

표적 조직

혈청형

표적 조직

AAV1

근육, 심장, 신경, 골격근

AAV rh10

간, 혈액, 심장, 체외세포

AAV2

근육, 간장, 뇌조직, 눈, 신경

AAV2-retro

신경세포(역방향 비시냅스)

AAV5

폐, 눈, 신경, 췌장

AAV-DJ

망막, 폐, 신장, 체외세포

AAV6

폐, 심장

AAV-DJ-8

간, 눈, 중추신경

AAV7

근육, 간장

AAV9-CNS

중추신경계

AAV8

근육, 간장, 신경, 눈

AAV9-PNS

주변신경계

AAV9

심장, 근육, 폐, 간장, 신경

더 많은 혈청형

상담을 환영합니다

 

AAV 바이러스 포장 서비스의 이점:

  • 주기가 짧다: 바이러스 현물 인도 속도가 2주, 맞춤 프로젝트는 5주까지 빨라진다.
  • 품질신뢰 : 바이러스 낙하도 확보 ≥1*10^12 GC/mL, 순도≥95%, 네마이신<10EU/mL로 높은 감염효율을 보장합니다.
  • 전문지원 : 탑재체 설계, 바이러스 포장 및 사용, 체내 주사부터 표형 분석까지 전문적인 기술지도를 제공합니다.
  • 경험이 풍부하다: 10여 년의 바이러스 포장 경험, 끊임없이 확충되는 현물창고, 여러 편의 고객 문헌을 인용하여 발표합니다.
  • AI 인공 지능 지원: AAV 캐리어 개발 및 최적화 변환 서비스를 제공하는 강력한 인공 지능 및 생물 정보팀을 보유하고 있습니다.
 
AAV 바이러스 포장 기술 경로:

 
AAV 바이러스 탑재체 포장을 제외하고 Cyagen은 다음과 같은 LV, ADV 바이러스 포장을 제공합니다
 

바이러스 운반체 종류

바이러스 점적도

주기

느린 바이러스(LV)

표준 규격

≥1*10^8 TU/mL

5-8주

순화

≥1*10^9 TU/mL

아데노 바이러스(ADV)

표준 규격

≥1*10^10 PFU/mL

7-10주

순화

≥1*10^12 PFU/mL

 
바이러스 포장에 자주 발생하는 문제:

Q1: AAV, LV, ADV, 세 가지 도구 바이러스는 무엇이 다릅니까?

프로젝트

AAV

ADV

LV

입자 지름

20-30nm

90-100nm

80-100nm

게놈

4.7kb 싱글체인 DNA 또는 2.4kb 듀얼체인 DNA

36kb 듀얼체인 DNA

9.3kb 듀얼체인 RNA

탑재 용량

≤4.5kb

8.3kb

≤6kb

표현량

중고급 단계별 표현

수준 높은 순간 표현

중등 수준의 안정적 표현

표현의 실효성

7-14일 정도부터 표현합니다

1-2일 정도부터 표현합니다

2-4일 정도부터 표현합니다

보통 6개월~24개월

지속 ≤(2-4) 주

지속≥6개월

체내 확산 능력

일반

면역원성

극히 낮다

중저

통합방식

소량 방향 통합

비통합

고주파 랜덤 통합

특징

생산량이 많고 구성도 간단하며 안전성이 좋다

생산량이 높으면 순화하기 쉽다

생산량이 비교적 낮고, 안정적으로 표현한다

적용

동물실험 1순위

세포/동물의 비교적 큰 유전자 과표현

세포 실험 1순위

 

Q2: 왜 AAV는 현재 유전자 치료 분야에서 가장 핫한 탑재체인가?

AAV는 다음과 같은 강점을 가지고 있기 때문이다.

1.숙주 범위가 넓다: 분열과 비분열 세포;

2.안전성 높음:  AAV 미발견; ITR 및 rep/cap 독립질자 표현 ;

3. 면역원성이 낮다: 동물이나 인체에 미치는 면역반응은 작습니다. 몇 가지 바이러스 운반체 중 상대적으로 가장 작습니다.

4.표적성이 좋다: 다양한 혈청형, 조직 특이성.
 

Q3: AAV가 동물 체내에서 표현될 수 있도록 하기 위해서는 어떤 관전포인트가 필요한가?

1.혈청형의 선택. AAV의 혈청형은 주로 AAV 캡시드 단백질(capsid protein)의 구조에 의해 결정되며, 서로 다른 캡시드 단백질(capsid protein)의 구조는 서로 다른 세포 표면 수용체를 인식하기 때문에 혈청형의 선택은 AAV의 감염 효율성, 조직 친화성, 그리고 표현 개시 시점에 영향을 줄 수 있습니다.

2. 프로모터(Promoter) 선택. 광의의 발기인(broad-spectrum promoter) 또는 특정 프로모터를 선택할지 여부. 혈청형의 조직 특이성에 비해 특이성 프로모터는 세포의 특이성을 실현할 수 있으므로 특이성에 대한 요구가 높은 연구는 어떤 세포 특이성 표현의 프로모터를 선택할 수 있습니다.

3.주사 방식. 국부 주사를 할 수 있는 조직 장기의 경우 국부 다중점 주사 과녁 기관을 사용하면 더 좋은 특이성과 표현 효과를 얻을 수 있습니다.

4.바이러스의 양과 점적도. 표적기관 조직과 사용하는 AAV 혈청형 (확산능력이 다름) 에 따라 주사를 추천하는 AAV 의 양이 다르기 때문에 조직에 전달되는 바이러스 입자의 수가 감염 효과에 큰 영향을 미친다. 하지만 AAV 사용량은 많을수록 좋아지는 것이 아니라 과다한 양에 바이러스가 넘쳐날 수 있습니다. 또 우리 경험에 따르면 바이러스 양이 너무 많아 표현이 떨어지는 경우도 있습니다.구체적인 조직의 바이러스 사용량을 알고 싶으면 연락 주시면 됩니다.

5. 검사 시간. 유전자에 따라 피크 시간이 다르고, 게다가 AAV는 외사슬 DNA에서 쌍사슬 DNA로 바뀌어야 하기 때문에 일반적으로 2주에 유전자 발현을 검출할 수 있습니다. 항체의 영향이 없을 경우 유전자의 발현은 반년 이상 지속됩니다.
 

Q4: AAV 주사 마우스, 얼마나 많은 바이러스 양이 충분합니까?

AAV 주사 총량에 영향을 주는 요소는 매우 많으며 비교적 중요한 것은 혈청형, 목표조직 유형, 주사 방식(국소 또는 전신), 동물 모형(예컨대 큰쥐나 작은쥐) 등이 있있습니다. 문헌 보도가 있는 경우 문헌을 참고할 수 있는 주사 방법은 몇 개의 서로 다른 계단식 설치를 하는 것이 가장 좋습니다. 예를 들어 AAV9 는 쥐의 심장조직 (심근세포) 에 감염되며, 꼬리정맥 주사나 심근다점 주사를 사용할 수 있습니다. 미정맥주사는 1011vg/mL, 100μL 추천합니다.원점주사는 1010vg/mL, 20μL/점을 추천합니다.다른 조직의 AAV 주사 바이러스 양에 대해 더 알고 싶은 추천은 저희에게 연락할 수 있습니다.

 

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  • 15년 이상의 맞춤형 동물 모델 제작 경험이 있습니다.
  • 78,000 마리 이상의 Mouse 및 Rat 모델을 전 세계로 제공해 왔습니다.
  • SCI 저널에 4,700 건이 넘는 인용문이 실렸습니다.
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