고지 고콜레스테롤 고과당 음식 유도 NASH 마우스 모형

질병 동물 모델은 인간의 질병 발생 발전 메커니즘, 약물 선별 및 치료 효과 평가에 필수적인 도구로 좋은 질병 동물 모델은 신약 개발에 속도를 낼 수 있습니다. 당신은 아직도 어떤 마우스 모형을 선택해야 할지 몰라 걱정하고 있습니까?당신은 아직도 모형을 만드느라고 걱정하니? Cyagen새로운 칼럼' 매주 마우스' 는 매주 쇄신하며 질병쥐 모델의 이야기를 들려드리며 다양한 질병쥐 모델을 이해하는 데 도움이 되기를 바랍니다. 오늘은 고지 고콜레스테롤 고과당 음식 유도 NASH 마우스 모형을 만나 보겠습니다.

동물에게 고지방, 고당 사료를 먹이는 지방간 모델을 주는데, 그 주요 발병 메커니즘은 영양 과잉입니다. 음식물 중 지방, 콜레스테롤, 당류 과잉은 완전히 흡수되지 못하고, 지방은 간에 쌓여 지방간을 유발하며, 간염성변경 및 섬유화가 추가되었습니다.사람의 비알코올성 지방성 간질환(NAFLD)과 비슷한 모델로 가장 흔한 NAFLD 동물 모델입니다.

Cyagen의 고지 콜레스테롤인 고과당사료(GAN)수유를 통해 구축된 NASH 마우스모델은 비알코올성 지방간의 병리적 생리기제 및 신약개발을 설명하는 동물모델로 사용됩니다.

전략 세우

Gubra-Amylin NASH(GAN) 사료, 즉 고지방 고콜레스테롤 고과당 사료(40% 지방공급, 20% 과당, 2% 콜레스테롤)로 생쥐를 26주 이상 먹인다.(보통 16주부터 지방변성이 나타나기 시작해 26주 NASH 형성, 26~32주 섬유화 유도)

모형 검증

1.체중 및 혈생화 검사

그림1. GAN 고지방 고콜레스테롤 고과당 음식로 유도한 NASH 모델의 체중 및 혈생화 검사. 야생형 C57BL/6수컷 쥐를 무작위로 10마리씩 2조로 나누어 표준사료(control조)와 고지방, 고콜레스테롤, 고과당사료(NASH그룹)로 각각 먹입니다.시간대별로 (A) 체중，(B) 6h 공복혈당치，(C) ALT 농도，(D) AST 농도，(E) 혈청 총콜레스테롤(TC) 농도를 측정한다.데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다.Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석. ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001.

결과 : 모델링 30주 시 NASH그룹 생쥐의 체중, 6h 공복혈당치, 혈청중 ALT, AST, TC 농도가 대조그룹보다 현저히 높았습니다.

2 간 중량, 간 무게 대비 체중 비율, 간 조직 부피 검사

그림 2. 고지방 고콜레스테롤 고과당 식이유도를 이용한 NASH 모델의 간 조직 검사합니다. 모델링 후 16주차부터 동차 대조조와 NASH조 마우스 2마리를 시간별로 해부 관찰하여 (A) 간 무게,(B) 간 무게/체중, (C) 사육 후 26주차 마우스의 간 조직을 검사합니다. 데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다.Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석.ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。

결과: NASH조 마우스의 간 무게, 간 무게 비중, 간 조직 부피가 대조군에 비해 모두 높아진 것으로 나타났습니다.

3 간 조직 병리 절편 및 NAS 평점

그림 3. 고지방 고콜레스테롤 고과당 식사로 유도한 NASH 모델의 병리절편 및 NAS 평점입니다. 사육한 지 26 주 후 쥐의 간 조직 병리 슬라이스: (A) 정상 대조조 마우스의 간소엽 구조는 선명하고 완전하며 간세포는 중앙정맥을 중심으로 방사형으로 배열되어 있으며, 간세포 풍선변이나 염증세포 침윤이 없음.(B) NASH 조 마우스의 간조직 소엽 구조가 문란하고, 대포성 지방 방울이 전체 세포의 2/3 이상을 차지하며, 심각한 지방 변성이 나타나며, 국소적으로 침윤을 위주로 하는 난로 괴사성 염증; 붉은 화살표: 지방 변성; 파란색 화살표: 풍선처럼 변합니다.(C) NASH조 마우스의 간섬유화는 F2급 기준(moderate중도섬유화)에 도달할 수 있습니다. 붉은색 화살표:섬유화.(D)NAS 평점.데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다.Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석. ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。Scale bar = 100 µm.

간조직 병리절편 결과, 모형 만든 26주 후 대조조에 비해 NASH조 마우스의 간조직에서 지방변성, 풍선변성, 섬유화가 뚜렷하게 나타났습니다.또한 NASH조 마우스의 NAS 평점은 모델링 후 16주차부터 모두 5점을 기록하여 대조조과 큰 차이를 보였으며, NASH 마우스는 모델링에 성공했습니다.

Cyagen은 음식유도 비알코올성 지방간 마우스 모형 외에도 다양한 비알코올성 지방간 마우스 모형(예를 들어 화학물질 유발 모델, 유전자 편집 모델, 복합 모델) 및 표형 분석서비스를 제공한다. 필요하다면 당신의 연구를 위한 맞춤 제작을 위해 연락 주세요. 

About Cyagen

Cyagen은 15 년 동안 발전해 전 세계 수만 명의 과학자에게 봉사했으며, 제품과 기술은 CNS(Cell, Nature, Science) 3 대 저널을 포함한 4500 여 편의 학술 논문에 직접 적용되었습니다.유전자녹아웃,  유전자노크인, 조건부 녹아웃 모델 맞춤형 서비스 외에도 Cyagen에는 전문적인 수술질환 모델팀이 있어 다양하고 세밀한 작은 동물수술 질병모델을 제공할 수 있습니다. 약물선별평가 생쥐 플랫폼은 구미 업계 리더로부터 도입한 면역결핍쥐, 심혈관 및 알츠하이머병 등의 연구에 사용되는 인간화 마우스를 제공할 수 있습니다. 국제 표준화 무균쥐 기술 플랫폼은 무균쥐, 무균동물 맞춤형 서비스, 미생물 균군 이식 서비스 등 무균동물 모델에 기반한 각종 제품과 서비스를 제공할 수 있으며, Cyagen의 성숙하고 안정적인 유전자 편집 생쥐 플랫폼과 결합하여 균군과 유전자의 상호작용 메커니즘을 연구하는데 도움을 줄 수 있습니다.