녹아웃(KO) 마우스 | Cyagen Korea
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렌티 바이러스(LV)와 아데노 관련바이러스(AAV)는 감염 특성이 다르지만 주로 쓰이는 바이러스 벡터다.이 가운데 AAV 는 조직특이성, 면역원성 저하, 안전성이 높은 장점으로 현재 유전자 전달(gene transduction)과 유전자 치료에 가장 널리 사용되는 벡터가 되고 있다.렌티 바이러스(LV) 벡터는 CAR-T세포 구축과 같은 세포 치료에 가장 많이 사용된다.렌티 바이러스는 숙주 범위가 넓고 표적 유전자 발현이 안정적이며 포유동물 세포에 대한 감염효율이 높다는 장점이 있다.

Cyagen은 렌티 바이러스와 아데노 관련 바이러스 패키지 서비스를 제공하고 있으며, 종합적인 품질 평가를 제공하여 역가(titer)와 순도 측면에서 바이러스 패키지 품질에 대한 신뢰성을 확보하고 있다.이러한 렌티 바이러스 벡터와 아데노 관련 바이러스 벡터는 다양한 세포 모델 구축, 생체 동물 체내 투여, 유전자 치료 등의 연구 분야에 널리 활용되고 있다.또한 우리의 체외, 체외 모델 개발과 표형 평가 서비스는 세계적인 세포 및 유전자 치료 연구의 CRO 기업이 될 수 있게 해준다.

렌티 바이러스(LV) 패키징
Cyagen은 3세대 슬로바이러스 탑재체 시스템으로 역가(titer)가 높고 세포독성이 낮아 감염효율이 높다는 장점이 있다.우리는 렌티 바이러스 패키지 서비스(예를들어: 과표현, 간섭 및 녹아웃)를 제공하고 있으며, 각종 종양 항원에 대한 CAR 분자와 CAR 바이러스 패키지를 설계하고 있다.세포와 유전자 치료를 연구하는 CRO회사로서 Cyagen은 체내·체외 모델 개발과 CAR-T 세포 약효학 평가 서비스도 제공한다.
System Guaranteed Yield Promotion Price (USD/Strain) Turnaround Time Ordering
Over-expression ≥1E+8 TU (Titer≥ 1E+8 TU/ml) $1,400 $1,200 As fast as 3 weeks
≥1E+9 TU (Titer≥ 1E+9 TU/ml) $2,900 $2,400
Interference (3 shRNA) ≥1E+8 TU (Titer≥ 1E+8 TU/ml) $1,900 $1,600
≥1E+9 TU (Titer≥ 1E+9 TU/ml) $3,800 $3,200
Knockout ≥1E+8 TU (Titer≥ 1E+8 TU/ml) $3,000 $2,500
TU: Transducing units
아데노 관련 바이러스 (AAV) 패키징
아데노 관련 바이러스(AAV)는 직경 약 26nm의 정이십면체 단백질 캡시드( icosahedral protein capsid )와 약 4.7kb의 단일 사슬 DNA 게놈으로 구성되어 있으며, plus strand(sense) 또는 minus strand(anti-sense)로 사용될 수 있다. AAV 벡터은 대부분 유리형을 유지하므로 유전 물질이 효과적이고 장기적으로 비분열 세포로 전달될 수 있다.AAV는 조직특성이 높고 면역원성이 낮으며 확산성이 좋아 안전성이 좋고 숙주 범위가 넓은 것이 특징이다. AAV는 특히 체내 연구에 적용되며 유전자 치료 분야에서 가장 유망한 바이러스 벡터 중 하나로 떠올랐다.
Serotypes Guaranteed Yield Promotion Price (USD/Strain) Turnaround Time Ordering
Normal-yield AAV Serotypes 1E+12GC (Titer≥ 5E+12GC/ml) $1,200 $1,000 As fast as 3 weeks
2E+12GC (Titer≥ 5E+12GC/ml) $1,650 $1,400
5E+142GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $2,150 $1,800
1E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $3,350 $2,800
2E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $5,650 $4,800
5E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $10,050 $8,500
≥1E+14GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) Request Quote
Low-yield AAV Serotypes (AAV2/4/6//i.e/Anc80/DJ8) 1E+12GC (Titer≥ 5E+12GC/ml) $1,650 $1,400
2E+12GC (Titer≥ 5E+12GC/ml) $2,150 $1,800
5E+12GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $3,350 $2,800
1E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) $5,700 $4,800
2E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml $10,050 $8,500
≥5E+13GC (Titer≥ 1E+13GC/ml) Request Quote

GC = genome copies (physical titer)

프로모션 시간:  5월 24일 - 7월 31일
대상: 한국의 단말 고객. 다른 지역은 저희에게 연락 주세요.
  • 새론운 고객은 더 낮은 할인을 받을 수 있습니다. 더 자세한 사항은 연락 주십시오!
  • 폼에 나와 있는 주기는 생산 개시 시점부터 프로젝트가 완료되기까지이며, 템플릿 DNA나 바이러스 운반체 등 어떠한 고객으로부터 자료를 제공받거나 고객에게 운송하기 위해 대기하는 시간은 포함하지 않습니다.
더 많은 프로모션 디테일을 알고 싶으니 언제든지 연락 주세요.
86 20-31601779 | service-apac@cyagen.com
Case Study
Case 1
Lentiviral Titer via Flow Cytometry - CD19 Antigen
Case 2
Bioactivity Measurements of AAV Vectors

The lentiviral purification solution expressing CD19 antigen was diluted in four gradients (0.01, 0.1, 1, 10 μL) and added to the same number of 293T cells separately. After 72 hours, the positive rate of 293T cells was detected by flow cytometry. The percentage of virus-infected 293T cells to the total number of cells), and then calculate the transduction titer of the lentivirus according to the following formula: Titer= (A+10*B)*N*103/ (2*V) Tu/ml

Figure 1. Results of CD19 antigen lentivirus titer test
The number of CD19 antigen-positive cells gradually increases with the increase of the transfection virus gradient, indicating that the lentivirus has infectious activity. The calculated virus titer is 1.4×108 TU/mL.
  Fluorescence monitoring of AAV-GFP-infected HEK293T cells
HEK293T cells were exposed to three AAV serotypes (AAV2, AAV8 and AAV9) at 3 multiplicity of infections (MOI) each (1E4, 1E5 and 1E6 vg/cell), and the infection efficiency of AAV was identified by GFP fluorescence observation and flow cytometry. In the observation of fluorescence intensity, AAV2, AAV8, and AAV9 infected HEK293T cells at MOI=IE5 vg/cell, respectively, and a strong fluorescence signal could be observed after 48h.
  Flow cytometry of AAV-GFP-infected HEK293T cells
In the flow cytometry detection, the AAV2 vector with a multiplicity of infection (MOI) of IE3 vg/cell had an average proportion of GFP-positive cells of 94.38%, and other groups also showed higher rates of GFP-positive cells, indicating that AAV has a higher infection activity.
Cyagen 바이러스 패키징의 장점
FAQs

What is the difference between AAV and LV viral vectors?

Project AAV LV
Particle diameter 20-30nm 80-100nm
Genome 4.7kb single-stranded DNA or 2.4kb double-stranded DNA 9.3 kb double-stranded RNA
Capacity ≤4.5kb ≤6kb
Expression Phased expression at medium to high level Moderately stable expression
Expression Duration Begin to express within 7-14 days, Begin to express in 2-4 days,
Generally 6 months to 24 months Lasts ≥6 months
Diffusion capacity in vivo High Ordinary
Immunogenicity Very low Low
Integration method Small amount of targeted integration High frequency random integration
Advantages High yield, simple composition, good safety Low yield, stable expression
Application Animal experiments Cell experiments

Why is AAV the most popular vector in the field of gene therapy?

Because AAV has the following advantages:
​​1. Wide host range: dividing and non-dividing cells;
2. High safety: No pathogenic AAV is found; ITR and rep/cap are expressed on independent plasmids;
3. Low immunogenicity: The immune response to AAV in animals or humans is the smallest among several viral vectors;
4. Good targeting: a variety of serotypes and tissue specificity options.

How much virus is sufficient for AAV injection in mice?

There are many factors that affect the total amount of AAV injection. The most important ones are serotype, target tissue type, injection method (local or systemic), and animal model (such as rat or mouse). For those reported in the literature, please refer to the recorded injection methods for your application; it is considered best practice to set several gradients in initial experiments. For example, using AAV9 to infect mouse heart tissue (cardiomyocytes), either tail vein injection or myocardial multi-point injection is recommended. Tail vein injection recommends 1011 vg/mL, 100 μL; origin injection is recommended 1010 vg/mL, 20 μL/point. If you want to know more about the AAV virus injection recommendations of different applications, please contact us.