자체 개발한 TurboKnockout^® 기술과 최적화된 CRISPR-Pro 기술을 사용하여 여러가지 ACE2 마우스를 제작하였으며, 연구자는 목적에 따라 알맞은 ACE2 마우스 모델을 선택할 수 있다.

CRISPR/Cas9 기술은 종에 제한이 없고 조작이 간단하며, 저렴하고 제작 기간이 짧지만 특허 분쟁 등 문제가 있다. 반면에, ES Cell Targeting 기술은 복잡한 유전자 편집이 가능하며 Off-target effect가 없지만 종에 제한이 있다.

그러므로 일반적인 Conventional Knock-Out 마우스 모델, Knock-In 마우스 모델 및 C57BL/6 외에 기타 종의 모델을 제작 시, CRISPR/Cas9 기술을 선택하는 것을 권장한다. 그러나 복잡한 마우스 모델 제작 프로젝트를 진행하는 연구자 또는 동물 모델 지적 재산권 분쟁에 대한 우려가 있는 연구자의 경우, ES Cell Targeting 기술을 기반으로 한 TurboKnockout^® 기술을 선택하는 것을 추천한다.

동시에 BALB/c, C57BL/6J, C57BL/6N 세 가지 strain의 ACE2 Humanized 마우스를 제작하였다.

C57BL/6 strain은 site-directed modification 및 유전자 변형에 우선적으로 사용되는 strain으로 각종 종양 발병률이 낮다는 등의 특징을 갖고 있으며, 음식 유도 비만과 만성 실험성 자가면역성 뇌척수염 다발성 경화증 모델을 연구하는 데에 우선적으로 사용되는 모델이다.

BALB/c strain은 알비노(Albino), 면역결핍과 같은 특징을 가지고 있고, 발암 물질에 매우 민감하며 종양학, 염증 및 자가 면역 등 연구 분야에서 자주 사용되는 마우스 strain뿐만 아니라 일부 신약 개발 프로젝트에 필요한 실험 동물 중에서 우선적으로 선택되는 마우스 strain이다. 또한 BALB/c 마우스가 C57BL/6 마우스에 비해 바이러스에 감염되기 쉽다는 연구결과가 나왔으며, BALB/c 마우스는 호중구와 림프세포가 폐조직(면역응답)에 더 많이 들어가 영향을 받는 구역이 크고 염증반응이 더 강하기 때문에 BALB/c strain의 ACE2 마우스도 SARS-CoV-2 연구에 사용될 수 있다.

다양한 유전자 편집 방안과 제작 전략:

Cyagen은 다양한 ACE2 Humanized 마우스 외에 ACE2 Conventional Knock-Out 마우스 및 Conditional Knock-Out 마우스 도 보유하고 있으며 ACE2가 마우스 전신 또는 특정 조직에서 Knock-Out될 수 있기 때문에 SARS-CoV-2 연구의 다양한 수요에 만족시킬 수 있다. 이 외에 연구자의 구체적인 요구에 따라 ACE2 Humanized 마우스를 다양한 전략으로 제작할 수 있으며 자세한 제작 전략은 아래와 같다.