녹아웃(KO) 마우스 | Cyagen Korea

Foxp3-IRES-mRFP(FIR) 리포터 마우스

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Model Description

Background: C57BL/6J

이 모델은 서로 다른 림프구 혈통과 림프 기관 유래 Foxp3를 발현하는 세포를 효과적으로 추적 및 구분할 수 있는 강력한 약물 테스트 도구이다.

● 자가면역 질환 중 면역 내수 메커니즘의 조절을 연구한다.

● 면역 체크포인트 억제제 발견을 통해 암을 치료한다.

 

이와 같은 리포터 마우스 모델은 광범위하게 사용 및 검증되어 50여개의 유명한 저널에 보도된 바 있다.

 

Strain 설명:

  • Foxp3는 마우스 체내에서 정상적인 생리적 발현과 조절 모드 구비
  • mRFP 리포터 유전자는 Foxp3의 발현을 진실되게 반영하였음

 

Foxp3는 조절성 T세포의 특이성 전사인자이며 조절성 T세포의 발육과 기능의 주요한 조절인자이다.

이 Foxp3-IRES-mRFP(FIR) 마우스 모델은 체내에서 Foxp3을 발현하는 세포를 직접 검출할 수 있다. 이 모델은 기타 기존에 무작위 삽입 방식으로 제작된 Foxp3 마우스에 비해 Foxp3의 생리적 발현을 보류하였고 또한 내인성 Foxp3을 모니터링할 수 있다.

 

내인성 Foxp3는 정상적인 생리적 발현 구비:

  • 내인성 Foxp3가 발현되고 작용 발휘: 리포터 유전자를 내인성 Foxp3 유전자 자리의 3'UTR에 삽입한다.
  • 삽입한 유전자 서열이 조절된다.
  • 리포터 유전자는 Foxp3의 발현을 진실되게 반영하였다.

 

Treg 세포 추적 가능:

  • mRFP의 발현을 모니터링하여 Foxp3를 발현하는 세포를 직접 검출할 수 있다(그림 1).
  • 면역체계 영향받지 않음: Treg 세포 기능이 온전하다(그림 2).
  • Treg 세포 이전과 cell sorting을 모니터링할 수 있다.

 

Model Validation

그림 1. mRFP의 발현은 체내 Foxp3를 발현한 T세포와 연관된다.

좌측 그림: 형광단으로 커플링된 항CD4와 항CD25 항체를 이용하여 Foxp3-IRES-mRFP 마우스의 외주 림프구를 염색하여 Foxp3의 발현을 검출하였다. 유세포술로 CD4 T세포의 mRFP 발현을 모니터링한다.

우측 그림: FACS로 FIR 마우스 외주 CD4 T세포의 서로 다른 서브 세트를 정제하고 RNA를 추출한다. TaqMan 실시간 정량 PCR을 통해 Foxp3의 상대적 mRNA 수준을 측정하고 2개 실험의 합병 결과를 그린다.

 

Model Validation

그림 2. mRFP의 발현은 체내에 Foxp3를 발현하는 T세포의 조절 활성에 영향주지 않는다.

mRFP 공발현 시 Foxp3를 발현하는 세포의 억제 작용이 영향을 받지 않는다. FACS로 CD4+mRFP+ 억제(S)와 CD4+CD25-mRFP- 응답(R) T세포를 정제한다. 억제세포와 응답세포를 단독 배양하거나 지정 비율(R:S)로 혼합하되 응답세포 수량은 변하지 않고 그대로 유지한다. 피폭된 APC가 존재하는 상황에서 T세포가 가용성 항CD3와 항CD28 항체에 의해 활성화된다. 3일 간 자극 후 [3H] 티미딘 이입측정법을 통해 T세포 증식 수준을 측정한다.

 

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Category Strain Name Background Order Amount
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Reporter Mouse Models Foxp3-IRES-mRFP (FIR)  / / /

Price Availability

  • Sex: Female
  • Age: 3 to 8 weeks
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Digital Resources:

Foxp3-IRES-mRFP (FIR) Reporter Mouse
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Mouse Models for
Drug Screening & Assessment
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Cyagen Animal Models
Catalog - 2021
(brochure)
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1. Wan YY; Flavell RA. 2005. Identifying Foxp3-expressing suppressor T cells with a bicistronic reporter. Proc Natl Acad Sci USA 102 (14) : 5126-31.

2. Gutcher I; Donkor MK; Ma Q; Rudensky AY; Flavell RA; Li MO. 2011. Autocrine Transforming Growth Factor-beta1 Promotes In Vivo Th17 Cell Differentiation. Immunity 34 (3) : 396-408.

3. Chae WJ; Gibson TF; Zelterman D; Hao L; Henegariu O; Bothwell AL. 2010. Ablation of IL-17A abrogates progression of spontaneous intestinal tumorigenesis. Proc Natl Acad Sci USA 107 (12) : 5540-4.

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