녹아웃(KO) 마우스 | Cyagen Korea

C-NKG 마우스는 성숙된 T, B, NK 면역세포의 결핍으로 보체활성이 저하되고 대식세포가 인간세포에 대한 병탄작용이 약하여 조혈모세포(HSC), 말초혈액단핵세포(PBMC), patient-derived xenograft(PDX) 또는 성체줄기세포와 조직을 효율적으로 이식할 수 있고, 현재 공인된 면역결핍 정도가 높으며 종양, 면역, 자가면역질환, 면역치료백신, GVHD/이식, 안전성 평가 등 연구에 우수한 모델이다.

 

Model Description

Strain Name: NOD/Shi-Prkdcscid Il2rgem1/Cyagen

Background: NOD/Shi-Scid

 

제작 전략:

C-NKG 마우스는 Cyagen이 CRISPR/Cas9 기술을 통해 NOD/Shi-Scid 배경 Strain에서 Il2rg 유전자를 녹아웃하여 자체 개발한 중증 면역 결핍 마우스이다.

 

Strain 설명:

  • 성숙된 T, B, NK 세포 결핍
  • 보체 활성 저하
  • 인간유래세포에 대한 대식세포의 식세포작용 약함
  • 수지상세포 기능 저하
  • T, B세포 누출 없음

 

연구 응용:

  • CDX와 PDX
  • 세포 면역요법의 유효성과 안전성 평가
  • 면역체계 인간화 마우스 모델 제작(인간의 PBMC 또는 HSC를 이식하여 인간의 면역체계 재건)
  • GvHD 모델
  • 종양 면역 관련 연구
  • 조혈과 줄기세포 관련 연구

 

 

Prkdc 유전자 돌연변이


그림 1. Prkdcscid 돌연변이는 Prkdc 유전자 84호 엑손 중 TAT→TAA로 발생하며 유전자 시퀀싱 결과, C-NKG 마우스가 Prkdcscid 돌연변이를 갖고 있는 것으로 확인된다.

 

Il2rg 유전자 녹아웃

Model Validation

그림 2. C-NKG 마우스Il2rg 유전자에 대해 PCR검사 진행 결과,NKG 마우스 Il2rg유전자의 성공적인 녹아웃을 확인했다.

 

● C-NKG 마우스 말초혈액 중 T, B, NK 세포의 검사

Model Validation Model Validation

그림 3. C-NKG 마우스 말초혈액 중 B, T, NK 세포가 심각하게 결실되며 중증 면역 결핍 마우스이다.

BALB/c, C-NKG 마우스의 말초혈액을 취하여 T, B와 NK 세포의 구성에 대해 대표적인 유식 세포 면역 표현형 분석 및 통계 대조를 진행하였다. 그 결과, BALB/c마우스에 비해, C-NKG 마우스의 말초혈액 중 B세포(CD3-CD19+), T세포(CD3+CD19-), 보조성 T세포(CD3+CD4+CD8-), 세포 독성 T세포(CD3+CD4-CD8+), NK세포(CD335+CD3-)가 거의 모두 결실된 것을 확인하였다.

 

● C-NKG 마우스의 림프조직 중 T, B, NK 세포의 검사

Model Validation Model Validation

그림 4. C-NKG 마우스 림프조직 중 B, T, NK 세포가 심각하게 결실되며 중증 면역 결핍 마우스이다.

BALB/c, C-NKG 마우스의 림프조직을 취하여 T, B와 NK 세포의 구성에 대해 대표적인 유식 세포 면역 표현형 분석 및 통계 대조를 진행하였다. 그 결과, BALB/c마우스에 비해, C-NKG 마우스의 림프조잭 중 B세포(CD3-CD19+), T세포(CD3+CD19-), 보조성 T세포(CD3+CD4+CD8-), 세포 독성 T세포(CD3+CD4-CD8+), NK세포(CD335+CD3-)가 거의 모두 결실된 것을 확인하였다.

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Digital Resources

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